抗原修復鍋采用的修復方法一共有兩種
更新時間：2020-02-25 點擊次數(shù)：2274次
抗原修復鍋怎樣工作？
看上去，抗原修復鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋”，主要用于抗原暴露的工作，主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制器來保持一定的溫度和壓力及一定的時間，這些工作參數(shù)都是經(jīng)過嚴格的科學實驗得到的數(shù)據(jù)。當達到需要的溫度，抗原修復鍋會在該溫度下保持幾分鐘，之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個多小時，特殊設材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。
免疫組織化學方法成功與否關鍵在于抗原決定簇的保存和暴露。組織經(jīng)甲醛固定，甲醛的醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變，從而影響檢測蛋白表達。要充分暴露抗原決定簇，通常用到抗原修復鍋。強烈推薦EMS*有競爭力的一款產(chǎn)品，適于甲醛固定的組織經(jīng)石蠟包埋后進行免疫染色前的處理，配合特別的抗原修復緩沖液確保你得到z高質(zhì)量的免疫染色效果。
(1)抗原修復鍋的加熱修復法：加熱修復法分為高壓加熱修復法和微波修復法兩種：
?、俑邏杭訜嵝迯头ǎ喝∫欢胯蹤此猁}緩沖液(pH＝6．0)于高壓鍋中，大火加熱直至沸騰。將脫蠟水化后的組織切片置于不銹鋼或耐高溫塑料切片架上，放人己沸騰的緩沖液中。蓋上鍋蓋，扣緊壓力閥，繼續(xù)加熱至噴汽。
從噴汽開始計時．1～2分鐘后，高壓鍋離開熱源，冷卻至室溫(稍冷后，可在自來水籠頭下加速冷卻)，取出玻片，先用蒸餾水沖洗2次，再用PBS沖洗2次，每次3分鐘。注意加熱時間長短的控制很重要，從組織切片放人緩沖液到高壓鍋離開火源的總時間控制在5―8分鐘為好．
時間過長可能會使染色背景加深。緩沖液的量必須保證能浸泡到切片，用過的枸櫞酸緩沖液不能反復使用。
?、诳乖迯湾伒奈⒉ㄐ迯头ǎ喝∫欢縫H6．0枸櫞酸鹽緩沖液(緩沖液量不得小于500m1)，于微波盒中，微波加熱直至沸騰，將脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫塑料切片架上。放人己沸騰的緩沖液中，中高檔微波繼續(xù)處理15―20分鐘，取出微波盒冷卻至室溫，從緩沖液中取出玻片。先用蒸餾水沖洗2次，之后用PBS沖洗2次，每次3分鐘。
(2)胰蛋白酶消化修復法：主要用于細胞內(nèi)抗原的顯示。使用0．1％氯化鈣液(pH7．8)制成0．1％胰蛋白酶液，37℃孵育切片15～30分鐘，之后用PBS洗滌3次，每次3分鐘。
(3)胃蛋白酶消化修復方法：主要用于細胞間質(zhì)抗原的顯示。一般使用濃度為0.4％，消化時間為37℃，30～180分鐘。
以上便是今天關于抗原修復鍋采用的修復方法一共有兩種的全部分享了，希望對大家今后使用本設備能有幫助。
發(fā)送消息